產品組分
組分
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性狀
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存儲條件
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規格
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A:英光GelMA
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海綿狀
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-20°℃,避光
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0.5 g/瓶
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B:光引發劑LAP
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白色粉末狀
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室溫,避光
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0.025 g/瓶
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產品熒光信息
型號
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激發波長
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發射波長
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熒光顏色
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GM-xx-RF
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-550 nm
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-610 nm
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紅
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GM-x0-GF
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~490 nm
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~520 nm
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綠
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材料簡介
甲基丙烯酰化明膠(GelMA)為雙鍵改性明膠,其可通過紫外及藍光固化成膠。GelMA光固化水凝膠兼具天然和合成生物材料的特性,其具有適于細胞生長和分化的三維結構。熒光 GelMA是在GelMA分子上化學接枝熒光分子,通過改變熒光分子類型而使其具有特定的熒光顏色。此化學標記方法避免了物理混合或靜電吸附等方法中熒光分子容易擴散出體系的缺點,同時也避免了熒光微粒成像不均的缺點。該熒光GelMA具有良好生物相容性,在體內外成像、示蹤、材料降解、生物傳感及3D打印工藝等領域有廣闊的應用前景。
產品應用
材料示蹤、體內外熒光成像、細胞培養、包被、生物3D打印、組織工程等。儲存及運輸
干態:-20℃避光,6個月,可常溫運輸。溶液:∶4℃避光,7天;-20℃避光,3個月;溶液反復凍融會影響產品性能,盡量現配現用。
溶液配制
1配制0.25% (w/v)引發劑標準溶液
(1)取10ml PBS,加入裝有引發劑IAP的棕色瓶中(內含0.025g LAP)。(2)以40-50℃水浴加熱溶解15分鐘.期間振蕩數次。
該LAP標準液在4℃避光條件下可保存12個月。
⒉配制熒光 GelMA溶液〈建議熒光GelMA濃度為5-30% (w/v))
(1)取所需質量的熒光GelMA放入離心管。
(2)取引發劑標準溶液加入到上述的離心管中,振蕩使GelMA充分浸潤。(3)l以40-50℃水浴避光加熱溶解30分鐘,期間振蕩數次。
(4)將GelMA溶液立即用0.22um無菌針頭過濾器滅菌(防止低溫凝膠化)。二維細胞培養建議
將熒光GelMA溶液于37°℃水浴保溫備用(防止低溫凝膠化)。
趁熱將熒光GelMA溶液注入孔板(96孔板:50~10CL/孔L、48孔板: 100~300puL孔, 24孔板:300-500L/孔L)。
以405nm光源,輻照10-30秒使凝膠化, 可通過光照時問及強度調控凝膠強度。>將培養基加入孔中覆蓋凝膠,置于37℃培養箱中5分鐘,清洗樣品,吸去培養基。將細胞懸浮液加入到孔板中即可。根據實驗設計進行培養基更換、觀察拍照等操作
(操作程序無特殊要求)。
三維細胞培養建議
>收集細胞并用37℃預熱的熒光GelMA溶液重懸,配制細胞懸液。>向孔板中加入細胞懸浮液。
(96孔板: 50~10QuL/孔, 48孔板:100~300uL/L,24孔板:300~500uL/L)。以405nm光源,輻照10-30秒使凝膠化, 可通過光照時間及強度調控凝膠強度。提示:加入一孔固化一孔,防止細胞沉淀。
》向各孔加入培養基.于37℃培養箱中5分鐘.清洗樣品,移去培養基。
加入新鮮培養基并長期培養。根據實驗設計進行培養基更換、觀察拍照、免疫熒光染色等操作〈操作程序無特殊要求)。
*注:在配制不同濃度熒光 GelMA 時,濃度越高,相應熒光強度越高,若要降低熒光強度,可將熒光 GelMA與普通 GelMA按一定比例混合使用。
★溫馨提示:請勿直視固化光源。
熒光水凝膠是一種自發熒光的高分子材料,具有可調的熒光顯色效果,因而在3D打印、生物傳感、熒光示蹤、仿生驅動等研究領域有廣闊的應用前景。
團隊研制的GelMA水凝膠具有固化速度快、生物兼容性優異等優點,已被哈佛、劍橋、麻省理工、香港理工、清華、北大、浙大等國內外高校的100多個課題組使用,研究成果已發表于Materials Horizons( IF=14.356 ),Small( IF=10.856 ),Biosensors and Bioelctronics( IF=9.518 ),Biofabrication( IF=7.236 )等期刊。
是否可以讓GelMA保持穩定,同時具有熒光特性?
團隊持續攻關,成功研發出了自帶熒光的GelMA水凝膠(BKNM-GM-GF/BKNM-GM-RF系列)。
一、熒光GelMA簡介
團隊研發的熒光GelMA是通過在GelMA上“嫁接”熒光分子實現的,因所嫁接熒光分子不同而具有特定的熒光顏色。此化學標記方法避免了物理混合或靜電吸附等方法中熒光分子容易擴散出體系的缺點,,同時也避免了熒光微粒成像不均的缺點。
二、熒光GelMA優點
1.熒光GelMA成像均勻。下圖為自帶熒光和混熒光微球的兩種GelMA成像對比,熒光GelMA成像均勻連續,混熒光微球GelMA表面顆粒感明顯。
2.熒光GelMA穩定不擴散。下圖為自帶熒光和混熒光分子的兩種GelMA擴散對比。混熒光分子的GelMA容易擴散;自帶熒光GelMA能長時間保持熒光特性。
3.熒光GelMA生物相容性優異。下圖為使用熒光GelMA和普通GelMA培養內皮細胞(RBE4)和骨干細胞(BMSC)第五天時的生長狀態,熒光GelMA與普通GelMA具有同等優異的生物相容性。
三、熒光GelMA應用案例
1.3D打印。近年來,GelMA已成為生物3D打印的明星墨水,熒光GelMA可使打印結構的表征更加清晰穩定。團隊研制的熒光GelMA可應用于全品類生物3D打印機,下圖為BKNM-BP系列生物3D打印機制造的熒光酷炫結構。
2.熒光示蹤。使用熒光GelMA,可方便追蹤GelMA或其他載體在體內的變化情況。自帶熒光GelMA不會在體內擴散,可真實地追蹤熒光物質的分布情況。
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