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重組牛腸激酶(組氨酸標簽)

重組牛腸激酶(組氨酸標簽)

【編號】BK-NRPA19L 【CAS號】CAS
【貨號】BK-NRPA19S-B 【規格】
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17715390137 / 18101240246 / 18914047343

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品    名:重組牛腸激酶(組氨酸標簽)(Recombinant Bovine Enterokinase, His-tag, rbEK-His)

規    格:200 U(液體),1000 U(液體),100 μg,1 mg,特殊訂制

產品形式:液體為1 U/μl rbEK-His, 50 mM Tris-HCl, 50%甘油, pH 8.0;凍干粉凍干前為50 mM Tris-HCl (pH 8.0)酶溶液

分 子 量:27.6 kDa(SDS-PAGE檢測約為30 kDa)

等 電 點:5.72

比 活 性:≥40000 U/mg,即1 mg rbEK-His至少切割2000 mg融合蛋白。

純    度:≥95%(SDS-PAGE檢測)

A280nm(1 mg/mL):1.95

內 毒 素:≤5 EU/mg

來    源:大腸桿菌

保存條件:-20℃保存

有 效 期:3年

活性定義:25℃,反應緩沖液為50 mM Tris-HCl (pH 8.0),底物為50 μg 1 mg/ml含酶切位點的融合蛋白,16 h內切割95%的融合蛋白所需的酶量為1個酶活力單位(1 U)。



相關介紹:

腸激酶(EC 3.4.21.9)是一種絲氨酸蛋白水解酶,能高效專一地識別蛋白質中Asp-Asp-Asp-Asp-Lys(DDDDK)序列,并在賴氨酸(Lys,K)的C端水解肽鍵,產生切割,在生物體內水解胰蛋白酶原轉變為胰蛋白酶,由于腸激酶具有高度專一性和高效酶切特性,廣泛應用于基因工程產品的開發。


天然腸激酶由1條115 kDa的重鏈和1條35 kDa的輕鏈組成,重鏈起錨定細胞膜的作用,輕鏈具有全酶完整的催化活性。本產品為牛腸激酶的輕鏈活性核心區域與組氨酸標簽的融合蛋白,采用大腸桿菌分泌技術表達,與天然腸激酶相比,比活性更高。同時帶有組氨酸標簽,酶切后可用鎳柱(NRPB07)去除樣品中的rbEK-His,特別適用于基因工程融合蛋白的酶切。


注意事項:

1)一些試劑會影響酶的活性,如 >2 M Urea,>250 mM NaCl,>20 mM β-ME,>0.1% SDS,>50 mM Imidazole,樣品中如果含有這些成分,需要透析至50 mM Tris-HCl (pH 8.0);

2)磷酸鹽會抑制腸激酶的活性,應避免使用磷酸鹽緩沖液作為酶切體系;

3)溶解后放置在冰浴上并盡量馬上使用;

4)若一次性用不完,請在使用前配制成母液并分裝成小規格(保證一次試驗的用量)保存在-65℃,避免反復凍融影響蛋白活性

5)避免使用強酸、強堿、強氧化劑、高濃度的有機溶劑等易引起蛋白質變性的試劑;

6)本產品僅限于科研使用。


圖片27.jpg

M:蛋白質分子量標準

Lane 1:rbEK-His





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